生物成品是指以微生物、细胞、动物或东说念主源组织和体液等为肇始原材料，用生物学时候制成，用于防备、挽救和会诊东说念主类疾病的制剂，可分为防备用生物成品、挽救用生物成品、按生物成品处罚的体内和体外会诊试剂4大类，包括疫苗、血液成品、细胞因子、单克隆抗体、细胞挽救家具、基因挽救家具、抗毒素及抗血清等。限制2022年底，寰宇生物成品企业(分娩许可证含s或d分类码)数目344家，灵验的生物成品批准文号1 735个。据统计，2022年环球年销售名次前10位的重磅家具中有8个是挽救用生物药物，除新冠药物外，阿达木单抗(Humira)、帕博利珠单抗(Keytruda)、度普利尤单抗(Dupixent)、阿柏西普(Eylea)已一语气多年参加环球TOP10药物榜单[1]，讲明生物成品在咫尺的疾病挽救中发扬着举足轻重的作用。

生物成品行动一类疏淡的药品，与传统的化学药物不同，具有分子结构复杂、生物学活性易变和理化脾气各样的特色[2]。生物成品起原多触及活的生物体，分娩工艺复杂、分娩周期长，分娩中使用的各式原、辅料亦起原各样，且成品组分一般不可汲取尖刻的末端理化处理。这些疏淡性使外源因子，卓越是潜在的病毒与微生物羞辱成为生物成品质地限制中的挑战[3]。

基于生物成品分娩工艺及过程限制的特色，本文要点敷陈无菌分娩中的羞辱限制政策，对分娩过程中无菌保证的疏淡性进行探讨和分析，以促进行业有针对性地升迁生物成品的无菌保险智商和水平，确保家具质地安全。

1 生物成品的一般分娩经过

生物成品分娩经常期为上游工艺、卑鄙工艺、制剂工艺3个时候阶段。上游工艺一般包括细胞库/菌种库/毒种库的制备、复苏、传代扩增、大限制培养、得益等步调。其中大限制培养工艺主要有流加补料培养(fed-batch)、灌流培养(perfusion)、浓缩流加补料培养(concentrated fed-batch)等相貌。卑鄙工艺一般包括离心、多步层析、病毒去除/灭活、超滤等步调，其最终想法是获取适宜质地要求的原液。制剂工艺一般包括半成品配制、除菌过滤、分装、冻干、轧盖、灯检、包装等步调，其最终想法是制得适宜质地要求的成品。

与常见的化学药品的无菌分娩不同，生物成品的上游工艺和制剂工艺皆触及无菌分娩要求，且若是家具不可进行除菌过滤，那么卑鄙阶段也需要按照无菌工艺分娩。从工艺经过来看，生物成品分娩工艺复杂、分娩周期较长(如单抗分娩周期经常在一个月以上)，无菌风险点较多，因此需要对每一个分娩环节皆制定矜重的限制政策，确保最终家具有时欢欣质地表率要求。

2 生物成品无菌保证的疏淡性

2.1 分娩中易被微生物羞辱

生物成品因其疏淡的分娩加工过程易被微生物羞辱[4]。举例，生物成品的肇始材料为生物活性物资，且其分娩触及生物过程和生物材料，易受内、外源因子羞辱。生物成品的分娩加工过程亦然生物学过程，培养中所用的物料、培养工艺也顺应微生物孕育。此外，生物成品家具本人亦然微生物孕育的养分物资。

针对以上特色，对生物成品的分娩全过程进行风险评估、识别存在微生物羞辱家具的风险点、制定羞辱限制政策相当浩大。厂房、设施的假想应能幸免羞辱东说念主员、物料的流向应该幸免交叉，东说念主员的操作应最大规章地裁减羞辱，分娩工艺应开辟裁减微生物负荷和细菌内毒素水平的步调，原、辅料应进行适宜的微生物和细菌内毒素检测模式，以全面加强对生物成品分娩过程羞辱的限制。

2.2 不可进行最终灭菌处理

无菌药品按分娩工艺可分为2类，汲取最终灭菌工艺的最终灭菌家具，以及部分或一齐工序汲取无菌分娩工艺的非最终灭菌家具。生物成品除个别微生态制剂和会诊试剂外，均为无菌药品，且为非最终灭菌家具，无菌保证风险较高。非最终灭菌家具又分为可除菌过滤的家具和不可除菌过滤家具。关于不可除菌过滤的家具，需要通过全程无菌操作工艺进行分娩。其无菌保证风险更高，分娩过程中微生物限制和无菌操作是保证家具无菌的关键。

鉴于生物成品最终处理的疏淡性，分娩过程的微生物羞辱限制不可仅局限于除菌过滤及之后的制剂工艺阶段，关于最终除菌过滤前的原液分娩及半成品配制阶段均应制定详备的羞辱限制政策，以尽可能裁减羞辱发生的概率。同期，应温文细菌内毒素等热原物资的限制与监测。关于分娩全过程均需汲取无菌分娩工艺的家具，更需要从分娩过程肇始阶段就奉行无菌限制要求，对每一个可能引入羞辱的风险环节作念到仔细识别、严格管控。

2.3 上游工艺无菌保证的疏淡性

限制微生物的羞辱是细胞/细菌/病毒培养得手与否的关键成分，上游工艺中的建库、复苏、传代、接种、培养等步调一朝被微生物羞辱，会导致培养的失败。而以上步调的敞口操作较多，因此，无菌的操作环境和培养环境是确保上游工艺培养得手的首要要求。

细胞/细菌/病毒的建库及复苏、传代操作经常是在C+A级的生物安全柜中进行，而传统预见上觉得无菌环境配景至少为B级区，因此，在此情况下无菌保证水平的限制和环境证据存在一定的难度，从而使复苏、传代的无菌保证存在较大挑战。相应地，需要采用一系列措施，如与细胞斗争的物料、工器用等灭菌使用，东说念主员操作按照无菌操作要求进行，分娩时对有敞口操作的区域进行执续环境监测等，以最大规章地保执上游分娩过程的无菌性。咫尺，部分企业在分娩中使用守秘器进行复苏和传代操作，无菌保证水平得到大幅升迁。

细胞/细菌/病毒的培养过程经常是在密闭系统中进行，培养使用一次性使用系统或者不锈钢系统。培养的环境要求是无菌环境，密闭系统和无菌环境若何同期驱散是至关浩大的推敲点。不锈钢系统的在线灭菌后保执无菌水平的期间需要经过充分的考证；一次性使用系统的走漏部分汲取的无菌收受、无菌切管、无菌勾通头等勾通时候应有时保证无菌保证水平，对其无菌对接或适宜相貌贯注羞辱的灵验性应进行充分的考证。无菌勾通时候的勾通过程不受外界环境等成分影响，可快速灵验的完成可靠的勾通，同期，可将无菌勾通过程中羞辱和交叉羞辱的风险降至最低，保证家具质地不受影响[5]。一次性储液袋或者储液瓶具有免清洗灭菌、无需清洁考证、使用便利等优点，既能为共线分娩带来便利，也可裁减分娩过程中交叉羞辱的风险，升迁分娩恶果，是咫尺行业内细胞/细菌/病毒培养过程中使用较多的储存容器。因此，用于细胞或者得益液的一次性无菌储液袋的无菌保证智商的证据也成为一个新的焦点。

2.4 卑鄙工艺无菌保证的疏淡性

卑鄙纯化阶段一般限制微生物规章，但无法除菌过滤的家具应在分娩全过程汲取无菌分娩工艺。色谱和超滤是生物成品卑鄙纯化分娩常用的时候技能，色谱和超滤系统应开辟相应的清洁与消毒步调并经过考证，以确保微生物得到灵验限制。工艺过程中使用的一次性系统的无菌性与密封性要求相当浩大。中间家具的暂存要求与期间亦然限制微生物的浩大成分，微生物会跟着时长而增殖，暂存期间应成为分娩过程限制的一部分。

原液的配制、分装、储存过程均有可能引起微生物负荷的变化，过程中使用的物料及容器的外源因子及无菌性限制起到关键作用，可通过过滤前微生物规章监测、过滤后对滤器进行好意思满性测试、原液储存过程中开展容器密封性考证等相貌确保过程中微生物限制的灵验。有些家具的注册表率华夏液有无菌查验模式，在这种情况下，原液的分娩应按无菌进行限制。

2.5 制剂工艺无菌保证的疏淡性

在制剂工艺阶段，生物成品的分娩与化学无菌药品的分娩基本一致，然而推敲到生物成品行动微生物孕育的雅致培养基，需要比化学药品愈加温文无菌保证智商。在灭菌系统考证、东说念主员更衣考证、环境监测及格、培养基模拟灌装考证及格的前提下，系数这个词东说念主、机、料、法、环各大系统皆必须保执考证景况并遵从严格的无菌保证措施。

制剂工艺中应开辟灵验的羞辱限制政策，在各方面采用措施幸免微生物、热原和微粒羞辱。在东说念主员羞辱限制方面，应范例洁净区内东说念主员更衣、着装和操作；设备与组件羞辱限制方面，应充分证据关键性分娩设备，充分考证消毒剂效劳，充分评估及处罚清洁考证，保证径直斗争物料与中间家具的工器用清洁、灭菌合理；设施环境羞辱限制方面，关键区域厂房设施假想、崇敬和使用过程监测应适宜无菌要求；物料羞辱限制方面，粗心关键物料运输与改变过程采用限制措施，并对物料进行微生物或细菌内毒素检测；分娩工艺过程羞辱限制方面，中间家具除菌过滤前应进行微生物负荷检测，以限制中间家具过程改变与储存中的羞辱风险。

2.6 无菌工艺模拟的疏淡性

无菌工艺模拟训练是汲取适宜的培养基或其他介质，模拟药品分娩中无菌操作的全过程，评价该工艺无菌保险水平的一系列行径。

生物成品除在制剂阶段需要进行无菌工艺模拟训练外，上游工艺也存在无菌操作步调。企业也应试虑对上游的无菌操作开展无菌工艺模拟。部分生物成品无法除菌过滤，需要全分娩过程无菌操作，这种情况下粗心卑鄙工艺开展无菌工艺模拟训练。部分生物成品在半成品分娩阶段也需要无菌操作，如关于好多含佐剂疫苗，佐剂的分娩和加入过程亦然生物成品无菌工艺模拟浩大的一部分。

3 斟酌

在生物成品无菌保证疏淡性分析的基础上，本文基于质地源于假想(QbD)科学理念，合理期骗风险评估、全过程质地限制和全人命周期处罚等技能，以保险成品安全、灵验、质地可控的总体要求为想法，依据国内生物成品行业发展近况和时候水平，结合国表里现存时候指南和律例要求，对生物成品无菌保证提议见解建议。

3.1 灵验识别生物成品分娩中的无菌风险

灵验识别生物成品分娩各阶段的无菌风险是确保家具不受微生物、热原和微粒等的羞辱的关键。

物料的质地限制情况关系到家具的最终质地。如血清、培养基、辅料等均一定进度上有助于微生物孕育，应灵验识别其起原合规性方面的风险。如动物起原的物料应幸免从可传播性海绵体脑炎(transmissible spongiform encephalopathies，TSE)、牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalomyelitis，BSE)多发区的地区采购，并应制定关系微生物限制的政策，以贯注引入羞辱；种子库的无菌风险主要存在于其制备和储存过程，在确保其活力和褂讪性的前提下，幸免受到外界的羞辱；发酵过程中设备和设施关于保管发酵培养过程的无菌性相当浩大，应当具有一定的密封性，幸免其他微生物引入的风险；纯化阶段应温文中间家具敞口操作的风险及汲取除菌过滤的相貌裁减微生物的负荷；制剂阶段应温文东说念主员操作、环境、设备等引入羞辱的可能，确保家具无菌风险。

3.2 针对性限制生物成品分娩中的无菌风险点

分娩全过程的无菌水平是成品取获取手的关键，加强全过程的无菌保证需作念好以下几个方面：

在上游工艺阶段，除限制合适的温度、溶氧、pH值等要求保证细胞平日代谢及增殖外，从种子复苏到细胞的逐级扩增过程中尽可能的应用无菌时候，操作主说念主员严格遵从表率操作步调，保执操作环境的洁净度，并对中间种子液设立细菌内毒素及微生物的中控打算。

不才游工艺阶段，关于可除菌过滤的成品，建议得益液经0.2 μm除菌过滤，可灵验裁减参加纯化色谱步调的微生物规章，且各步色谱及中间步调均应设立除菌过滤步调，并设定细菌内毒素和微生物规章中控打算；关于无法除菌过滤成品，过程严格按照无菌操作要求进行分娩。

在制剂工艺阶段，严格按照无菌要求对设施、设备和工艺进行适宜的假想、证据与考证，并执续进行证据；汲取适宜的无菌保险时候(如无菌对接与断开时候、RABS、守秘器等)，加强对家具制剂分娩的无菌保证，贯注微生物、内毒素或其他羞辱对家具的影响；加强对过程环境的快速环境检测技能，实时发现过程中的额外情况及趋势；加大对无菌区域东说念主员的培训，欢欣无菌操作要求。

在生物成品分娩可全过程实施羞辱限制政策(contamination control strategy，CCS)，评估关键质地限制点，监测药品安全的系数限制措施，灵验识别、评估、摈斥及限制羞辱的风险，尽可能地裁减分娩过程的羞辱，保证家具的安全[9]。

3.3 开辟生物成品全人命周期的无菌保证处罚理念

质地风险辘集于药品的研发、分娩、使用、退市的一齐家具质命周期，辘集原、辅料的购买、储存到家具分娩，再到运输、患者使用等过程。由于生物成品分娩过程复杂，且表征难度较大，因此对其进行风险评估更具挑战性。

裁减生物成品分娩过程引入羞辱的风险，除对分娩工艺进行雅致的假想、考证和日常限制除外，原液、中间品和成品等各阶段的微生物查验亦然浩大的技能，并应将无菌保证按照全人命周期进行处罚。

欧盟GMP附录1《无菌药品的分娩》关于药品全人命周期中的风险处罚提议了明确要求，粗心药品分娩过程中的质地风险进行评估、限制、相通、审核从而限制风险到可接受的进度。这不管从律举例故时候层面皆体现了药品监管的与时俱进。同期，欧盟GMP附录1对分娩时候、厂房设施、仪器设备等皆提议了新的要求，对无菌保证智商有了更高的表率[10]。在此配景下，生物成品企业应基于全人命周期的无菌保证理念开辟CCS，并如期评估其灵验性和合感性，分析各环节潜在的羞辱可能性，从而达到限制羞辱的想法。

文件起原

胡敬峰, 刘荣# 周勇, 冯巧巧, 杨敬鹏, 颜若曦. 生物成品无菌保证的疏淡性分析与探讨. 中国医药工业杂志. 2024, 55(10): 1426-1441

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